兔ELISA試劑盒是一種用于檢測(cè)免疫反應(yīng)的試劑盒,主要用于測(cè)定血清中特定抗原或抗體的含量。ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))是一種常見的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),可以在體外定量測(cè)定目標(biāo)分子的濃度。
兔ELISA試劑盒主要基于酶標(biāo)記的免疫反應(yīng)原理。一般而言,其步驟包括:
1.樣品處理:將待測(cè)樣品(血清、細(xì)胞上清液等)加入微孔板中。
2.結(jié)合:目標(biāo)抗原或抗體與樣品中的特定抗體或抗原發(fā)生特異性結(jié)合。
3.洗滌:通過(guò)洗滌步驟去除未結(jié)合的物質(zhì),以減少背景干擾。
4.酶標(biāo)記:加入酶標(biāo)記抗兔IgG,它會(huì)與已結(jié)合的目標(biāo)抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。
5.再洗滌:再次洗滌以去除未結(jié)合的酶標(biāo)記抗兔IgG。
6.反應(yīng):加入底物液,酶標(biāo)記抗兔IgG催化底物產(chǎn)生可測(cè)定的信號(hào)。
7.停止:加入停止液停止酶反應(yīng)。
8.讀取:使用吸光度測(cè)定儀測(cè)量微孔板中產(chǎn)生的信號(hào)的強(qiáng)度。
通常包括以下組分:
1.微孔板:通常是96孔板,用于固定樣品和試劑。
2.抗原或抗體液:用于與樣品中的特定抗體或抗原發(fā)生特異性結(jié)合。
3.酶標(biāo)記抗兔IgG:該抗體可與兔源性抗體發(fā)生特異性結(jié)合,并且其酶標(biāo)記能夠產(chǎn)生測(cè)定所需的信號(hào)。
4.底物液:添加到微孔板中,經(jīng)過(guò)酶催化反應(yīng)后產(chǎn)生可測(cè)定的信號(hào)。
5.停止液:用于停止酶反應(yīng),并穩(wěn)定信號(hào)。
6.標(biāo)準(zhǔn)曲線:包含已知濃度的目標(biāo)分子,用于校準(zhǔn)和定量分析。
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