更新時間:2021-07-21
小鼠促甲狀腺素釋放激素檢測試劑盒實驗試劑前準備,樣本收集,加樣,溫育,洗滌,顯色,比色,結果判定等,其中任何一項操作不當都會對檢測結果產生很大影響,必須加強ELISA檢測的全面zhi量控制,保證其結果的準確可靠。
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試劑盒保溫:
① ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么 ELISA 反應總是需要一定時間的溫育。
② 溫育常采用的溫度有 43℃、37℃、室溫和 4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。在建立 ELISA 方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在 37℃經 1-2 小時,產物的生成可達ding峰。為加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在 43℃進行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應 4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成多的沉淀。但因所需時間太長,在小鼠促甲狀腺素釋放激素檢測試劑盒中一般不予采用。
elisa試劑盒保存條件:
1 ) 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標準品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2 ) 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
注意事項:
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡
2. 洗滌進程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性
3. 一次加樣時刻控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔
5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,核算時請乘以稀釋倍數
6. 在制造標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液制造,不能混雜
7. 底物請避光保存
8. 小鼠促甲狀腺素釋放激素檢測試劑盒不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑
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